1
绪论
1
.生物化学研究的对象和内容是什么?
解答:生物化学主要研?/p>
:
?/p>
1
)生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能;
?/p>
2
)生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化;
?/p>
3
)生物遗传信息的储存、传递和表达?/p>
?/p>
4
)生物体新陈代谢的调节与控制?/p>
2
.你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关?/p>
提示:生物化学是生命科学的基础学科,注意从不同的角度,去理解并运用生物化学?/p>
知识?/p>
3
.说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓?/p>
解答:生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫?/p>
6
种是?/p>
白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质,即碳原子最外层?/p>
4
?/p>
电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键,碳还可与氮、氧和氢原子形成共价
键?/p>
碳与被键合原子形?/p>
4
个共价键的性质
,
使得碳骨架可形成线性?/p>
分支以及环状的多种多
性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成?/p>
生物分子碳骨架上的氨基(
-NH2
?/p>
、羟基(
-OH
?/p>
、羰基(?/p>
、羧基(
-COOH
?/p>
、巯基(
-SH
?/p>
、磷
酸基
?/p>
-PO4
?/p>
等功能基团?/p>
这些功能基团因氮?/p>
硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强
的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关?/p>
生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的
共价键聚合成链状?/p>
其主链骨架呈现周期性重复?/p>
构成蛋白质的构件?/p>
20
种基本氨基酸?/p>
?/p>
基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性(
N
端→
C
端)
,
蛋白质主链骨架呈
"
肽单?/p>
"
重复?/p>
核酸的构件是核苷?/p>
,
核苷酸通过
3
?/p>
,
5
?/p>
-
磷酸二酯键相连,核酸链也具有方向?/p>
(5
′、→
3
?/p>
),
核酸的主链骨架呈
"
磷酸
-
核糖
(或脱氧核糖?/p>
"
重复?/p>
构成脂质的构件是甘油?/p>
脂肪?/p>
和胆碱,其非极性烃长链也是一种重复结构;构成多糖的构件是单糖,单糖间通过糖苷键相
连,淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复?/p>
2
蛋白质化?/p>
1
.用于测定蛋白质多肽?/p>
N
端?/p>
C
端的常用方法有哪些?基本原理是什么?
解答?/p>
?/p>
1
?/p>
N-
末端测定法:常采用―二硝基氟苯法?/p>
Edman
降解法、丹磺酰氯法?/p>
①―二硝基氟苯
(DNFB
?/p>
FDNB)
法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与―二硝基氟苯(?/p>
DNFB
)反应(
Sanger
反应?/p>
,生?/p>
DNP
―多肽或
DNP
―蛋白质。由?/p>
DNFB
与氨基形成的键对
酸水解远比肽键稳定,
因此
DNP
―多肽经酸水解后?/p>
只有
N
―末端氨基酸为黄?/p>
DNP
―氨基酸
衍生物,其余的都是游离氨基酸?/p>
?/p>
丹磺酰氯
(DNS)
法:
多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰?/p>
?/p>
DNS
?/p>
Cl
?/p>
反应生成
DNS
―多肽或
DNS
―蛋白质。由?/p>
DNS
与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此
DNS
―多
肽经酸水解后?/p>
只有
N
―末端氨基酸为强烈的荧光物质
DNS
―氨基酸?/p>
其余的都是游离氨基酸?/p>
?/p>
苯异硫氰酸脂?/p>
PITC
?/p>
Edman
降解)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰?/p>
苯酯?/p>
PITC
)反应(
Edman
反应?/p>
,生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热
时,
N
―末端的
PTC
―氨基酸发生环化,生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来,除去
N
―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的?/p>
?/p>
氨肽酶法:氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶,能从多肽链的
N
端逐个地向里切?/p>
根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量,按反应时间和残基释放量作动力
学曲线,就能知道该蛋白质?/p>
N
端残基序列?/p>
?/p>
2
?/p>
C
―末端测定法:常采用肼解法、还原法、羧肽酶法?/p>