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一、过氧化物酶?/p>

POD

)活性的测定

 

 

POD

测定参照李合生等?/p>

2003

)的愈创木酚法方法进行测定,略加改动?/p>

 

测定:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

5mL 

1

?/p>

15

mol

?/p>

L PH=7.0

的磷酸缓冲溶液,冰浴

研磨成匀浆,

4

℃条件下

12000r/min

离心

15min

,上清液为粗酶液。然后在试管?/p>

?/p>

pH 7.0

的磷酸缓冲液

2 ml

?/p>

愈创木酚

?/p>

0.2%

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0.5ml

?/p>

浓度?/p>

0.15%

?/p>

H

2

O

2

 0.5ml

?/p>

?/p>

0.3ml

的酶提取液加入到试管中,

空白以缓冲液代替?/p>

?/p>

470nm

下测定其吸光度,

加入酶液时开始计时,每隔

30s

读数一次,连续记录

5

分钟。以每分钟每克鲜重增

?/p>

0.1

的酶量作为一个酶活性单位?/p>

 

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470 ×

V

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活?/p>

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0.01×

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式中?/p>

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反应时间内吸光度值的变化?/p>

 

V

T

 ----

提取酶液的总体积(

ml

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反应的时间(

min

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Vs ----

测定时取用酶液体积(

ml

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样品鲜重?/p>

g

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二、多酚氧化酶?/p>

PPO

)活性的测定

 

多酚氧化酶活性测定参照朱广廉?/p>

(1990)

的方法,略加改动?/p>

 

酶液制备:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

5mL 

0.1mol

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L PH=6.0

的磷酸缓冲溶?/p>

?/p>

冰浴研磨成浆?/p>

4

℃条件下

12000r/min

离心

15min

后上清液即为粗酶液?/p>

 

PPO

活性测定:

反应试管中分别加?/p>

0.1 mL

酶液

+3.9 mL

磷酸缓冲?/p>

+ 1 mL 

1m mol

?/p>

L

的邻苯二酚。混匀后于

 

30

℃保?/p>

 

10 min

,迅速加?/p>

 

2 mL

质量分数

?/p>

20

%的三氯乙酸终止反应,立即于

525nm

下测定其吸光度值,计算酶活?/p>

 

PPO

活?/p>

= 

 

 

 

O

D

×

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反应时间

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一、过氧化物酶?/p>

POD

)活性的测定

 

 

POD

测定参照李合生等?/p>

2003

)的愈创木酚法方法进行测定,略加改动?/p>

 

测定:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

5mL 

1

?/p>

15

mol

?/p>

L PH=7.0

的磷酸缓冲溶液,冰浴

研磨成匀浆,

4

℃条件下

12000r/min

离心

15min

,上清液为粗酶液。然后在试管?/p>

?/p>

pH 7.0

的磷酸缓冲液

2 ml

?/p>

愈创木酚

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0.2%

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0.15%

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的酶提取液加入到试管中,

空白以缓冲液代替?/p>

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470nm

下测定其吸光度,

加入酶液时开始计时,每隔

30s

读数一次,连续记录

5

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二、多酚氧化酶?/p>

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)活性的测定

 

多酚氧化酶活性测定参照朱广廉?/p>

(1990)

的方法,略加改动?/p>

 

酶液制备:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

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L PH=6.0

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冰浴研磨成浆?/p>

4

℃条件下

12000r/min

离心

15min

后上清液即为粗酶液?/p>

 

PPO

活性测定:

反应试管中分别加?/p>

0.1 mL

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+3.9 mL

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+ 1 mL 

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30

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10 min

,迅速加?/p>

 

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20

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525nm

下测定其吸光度值,计算酶活?/p>

 

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一、过氧化物酶?/p>

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)活性的测定

 

 

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测定参照李合生等?/p>

2003

)的愈创木酚法方法进行测定,略加改动?/p>

 

测定:称取样?/p>

0.5g

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1

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15

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,上清液为粗酶液。然后在试管?/p>

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2 ml

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的酶提取液加入到试管中,

空白以缓冲液代替?/p>

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470nm

下测定其吸光度,

加入酶液时开始计时,每隔

30s

读数一次,连续记录

5

分钟。以每分钟每克鲜重增

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二、多酚氧化酶?/p>

PPO

)活性的测定

 

多酚氧化酶活性测定参照朱广廉?/p>

(1990)

的方法,略加改动?/p>

 

酶液制备:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

5mL 

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L PH=6.0

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冰浴研磨成浆?/p>

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12000r/min

离心

15min

后上清液即为粗酶液?/p>

 

PPO

活性测定:

反应试管中分别加?/p>

0.1 mL

酶液

+3.9 mL

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+ 1 mL 

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30

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10 min

,迅速加?/p>

 

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20

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525nm

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PPO

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酶活性测定方?- 百度文库
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一、过氧化物酶?/p>

POD

)活性的测定

 

 

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测定参照李合生等?/p>

2003

)的愈创木酚法方法进行测定,略加改动?/p>

 

测定:称取样?/p>

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30s

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二、多酚氧化酶?/p>

PPO

)活性的测定

 

多酚氧化酶活性测定参照朱广廉?/p>

(1990)

的方法,略加改动?/p>

 

酶液制备:称取样?/p>

0.5g

,加?/p>

5mL 

0.1mol

?/p>

L PH=6.0

的磷酸缓冲溶?/p>

?/p>

冰浴研磨成浆?/p>

4

℃条件下

12000r/min

离心

15min

后上清液即为粗酶液?/p>

 

PPO

活性测定:

反应试管中分别加?/p>

0.1 mL

酶液

+3.9 mL

磷酸缓冲?/p>

+ 1 mL 

1m mol

?/p>

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的邻苯二酚。混匀后于

 

30

℃保?/p>

 

10 min

,迅速加?/p>

 

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质量分数

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20

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525nm

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PPO

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= 

 

 

 

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