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第二?/p>

 

 

 

细胞生物学实验技?/p>

 

一、名词解?/p>

 

1

.显微分辨率?/p>

microscopic 

resolution

?/p>

---

在一定条件下利用显微镜所能看到的?/p>

细程度?/p>

 

2

.放射自显影技术(

autoradiography

?/p>

---

用于整个细胞时,可以确定放射性标记物

在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时,能鉴定出放射性的条带或菌落?/p>

 

3

.双向凝胶电泳(

two-dimensional 

electrophoresis

?/p>

---

根据分子质量及等电点的不

同将复杂的蛋白质混合物分开?/p>

这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上?/p>

种蛋白质?/p>

 

4

.倒置显微镜(

inverted 

microscope

?/p>

---

一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的?/p>

细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比,其光源、聚光镜和物镜的?/p>

置是倒置的,即光源在上,物镜在载物台的下方。另外,其聚光镜和物镜有较长?/p>

工作距离,以方便放置有一定厚度的培养瓶?/p>

 

二、简答题

 

1

.电子显微镜为何不能观察活标本?

 

因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件?/p>

 

2

.简述冷冻蚀刻术的原理和方法?/p>

 

冷冻蚀刻(

freeze

?/p>

etching

)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的?/p>

复杂的复型技术?/p>

如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,

让样品中的冰在真?/p>

中升华,

而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构?/p>

当大量的冰升华之后,

对浮雕表

面进行铂一碳复型,

并在腐蚀性溶液中除去生物材料?/p>

复型经重蒸水多次清洗后,

捞在载网上作电镜观察?/p>

 

3

.比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜?/p>

 

答:都是用于放大与分辨微小结构,都是通过标本电子束的影响来探测标?/p>

结构?/p>

 

TEM

:电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切?/p>

标本,有极高的分辨率,可给出细微的胞内结构?/p>

 

SEM

:电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于显像屏上。可?/p>

反映未切片标本的的表面特征?/p>

 

4

.扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么?

 

 

扫描隧道显微镜(

scanning 

tunneling 

microscope

?/p>

STM

?/p>

 

?/p>

Binnig

?/p>

1981

?/p>

发明?/p>

是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的?/p>

当原子尺度的针尖在不?/p>

一个纳米的高度上扫描样品时?/p>

此处电子云重叠,

外加一电压

?/p>

2mV~2V

?/p>

?/p>

针尖?/p>

样品之间产生隧道效应而有电子逸出?/p>

形成隧道电流?/p>

电流强度和针尖与样品间的

距离有一指数关系?/p>

当探针沿物质表面按给定高度扫描时?/p>

因样品表面原子凹凸不

平,使探针与物质表面间的距离不断发生改变,从而引起电流不断发生改变。将?/p>

流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态?/p>

扫描隧道显微镜的分辨率很

高,横向?/p>

0.1~0.2nm

,纵向可?/p>

0.001nm

。它的优点是三态(固态、液态和气态)

物质均可进行观察,而普通电镜只能观察制作好的固体标本?/p>

 

优越性:

1)

高分辨率

 

原子级分辨率,横向为

1

埃,纵向?/p>

0.1

埃?/p>

2)

可直接绘

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细胞生物学实验技?/p>

 

一、名词解?/p>

 

1

.显微分辨率?/p>

microscopic 

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---

在一定条件下利用显微镜所能看到的?/p>

细程度?/p>

 

2

.放射自显影技术(

autoradiography

?/p>

---

用于整个细胞时,可以确定放射性标记物

在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时,能鉴定出放射性的条带或菌落?/p>

 

3

.双向凝胶电泳(

two-dimensional 

electrophoresis

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---

根据分子质量及等电点的不

同将复杂的蛋白质混合物分开?/p>

这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上?/p>

种蛋白质?/p>

 

4

.倒置显微镜(

inverted 

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---

一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的?/p>

细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比,其光源、聚光镜和物镜的?/p>

置是倒置的,即光源在上,物镜在载物台的下方。另外,其聚光镜和物镜有较长?/p>

工作距离,以方便放置有一定厚度的培养瓶?/p>

 

二、简答题

 

1

.电子显微镜为何不能观察活标本?

 

因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件?/p>

 

2

.简述冷冻蚀刻术的原理和方法?/p>

 

冷冻蚀刻(

freeze

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etching

)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的?/p>

复杂的复型技术?/p>

如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,

让样品中的冰在真?/p>

中升华,

而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构?/p>

当大量的冰升华之后,

对浮雕表

面进行铂一碳复型,

并在腐蚀性溶液中除去生物材料?/p>

复型经重蒸水多次清洗后,

捞在载网上作电镜观察?/p>

 

3

.比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜?/p>

 

答:都是用于放大与分辨微小结构,都是通过标本电子束的影响来探测标?/p>

结构?/p>

 

TEM

:电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切?/p>

标本,有极高的分辨率,可给出细微的胞内结构?/p>

 

SEM

:电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于显像屏上。可?/p>

反映未切片标本的的表面特征?/p>

 

4

.扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么?

 

 

扫描隧道显微镜(

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STM

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?/p>

Binnig

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1981

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发明?/p>

是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的?/p>

当原子尺度的针尖在不?/p>

一个纳米的高度上扫描样品时?/p>

此处电子云重叠,

外加一电压

?/p>

2mV~2V

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?/p>

针尖?/p>

样品之间产生隧道效应而有电子逸出?/p>

形成隧道电流?/p>

电流强度和针尖与样品间的

距离有一指数关系?/p>

当探针沿物质表面按给定高度扫描时?/p>

因样品表面原子凹凸不

平,使探针与物质表面间的距离不断发生改变,从而引起电流不断发生改变。将?/p>

流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态?/p>

扫描隧道显微镜的分辨率很

高,横向?/p>

0.1~0.2nm

,纵向可?/p>

0.001nm

。它的优点是三态(固态、液态和气态)

物质均可进行观察,而普通电镜只能观察制作好的固体标本?/p>

 

优越性:

1)

高分辨率

 

原子级分辨率,横向为

1

埃,纵向?/p>

0.1

埃?/p>

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.显微分辨率?/p>

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---

在一定条件下利用显微镜所能看到的?/p>

细程度?/p>

 

2

.放射自显影技术(

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---

用于整个细胞时,可以确定放射性标记物

在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时,能鉴定出放射性的条带或菌落?/p>

 

3

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根据分子质量及等电点的不

同将复杂的蛋白质混合物分开?/p>

这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上?/p>

种蛋白质?/p>

 

4

.倒置显微镜(

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---

一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的?/p>

细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比,其光源、聚光镜和物镜的?/p>

置是倒置的,即光源在上,物镜在载物台的下方。另外,其聚光镜和物镜有较长?/p>

工作距离,以方便放置有一定厚度的培养瓶?/p>

 

二、简答题

 

1

.电子显微镜为何不能观察活标本?

 

因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件?/p>

 

2

.简述冷冻蚀刻术的原理和方法?/p>

 

冷冻蚀刻(

freeze

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)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的?/p>

复杂的复型技术?/p>

如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,

让样品中的冰在真?/p>

中升华,

而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构?/p>

当大量的冰升华之后,

对浮雕表

面进行铂一碳复型,

并在腐蚀性溶液中除去生物材料?/p>

复型经重蒸水多次清洗后,

捞在载网上作电镜观察?/p>

 

3

.比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜?/p>

 

答:都是用于放大与分辨微小结构,都是通过标本电子束的影响来探测标?/p>

结构?/p>

 

TEM

:电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切?/p>

标本,有极高的分辨率,可给出细微的胞内结构?/p>

 

SEM

:电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于显像屏上。可?/p>

反映未切片标本的的表面特征?/p>

 

4

.扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么?

 

 

扫描隧道显微镜(

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STM

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?/p>

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1981

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发明?/p>

是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的?/p>

当原子尺度的针尖在不?/p>

一个纳米的高度上扫描样品时?/p>

此处电子云重叠,

外加一电压

?/p>

2mV~2V

?/p>

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针尖?/p>

样品之间产生隧道效应而有电子逸出?/p>

形成隧道电流?/p>

电流强度和针尖与样品间的

距离有一指数关系?/p>

当探针沿物质表面按给定高度扫描时?/p>

因样品表面原子凹凸不

平,使探针与物质表面间的距离不断发生改变,从而引起电流不断发生改变。将?/p>

流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态?/p>

扫描隧道显微镜的分辨率很

高,横向?/p>

0.1~0.2nm

,纵向可?/p>

0.001nm

。它的优点是三态(固态、液态和气态)

物质均可进行观察,而普通电镜只能观察制作好的固体标本?/p>

 

优越性:

1)

高分辨率

 

原子级分辨率,横向为

1

埃,纵向?/p>

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细胞生物学复习资?- 百度文库
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细胞生物学实验技?/p>

 

一、名词解?/p>

 

1

.显微分辨率?/p>

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在一定条件下利用显微镜所能看到的?/p>

细程度?/p>

 

2

.放射自显影技术(

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用于整个细胞时,可以确定放射性标记物

在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时,能鉴定出放射性的条带或菌落?/p>

 

3

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根据分子质量及等电点的不

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这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上?/p>

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4

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一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的?/p>

细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比,其光源、聚光镜和物镜的?/p>

置是倒置的,即光源在上,物镜在载物台的下方。另外,其聚光镜和物镜有较长?/p>

工作距离,以方便放置有一定厚度的培养瓶?/p>

 

二、简答题

 

1

.电子显微镜为何不能观察活标本?

 

因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件?/p>

 

2

.简述冷冻蚀刻术的原理和方法?/p>

 

冷冻蚀刻(

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)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的?/p>

复杂的复型技术?/p>

如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,

让样品中的冰在真?/p>

中升华,

而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构?/p>

当大量的冰升华之后,

对浮雕表

面进行铂一碳复型,

并在腐蚀性溶液中除去生物材料?/p>

复型经重蒸水多次清洗后,

捞在载网上作电镜观察?/p>

 

3

.比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜?/p>

 

答:都是用于放大与分辨微小结构,都是通过标本电子束的影响来探测标?/p>

结构?/p>

 

TEM

:电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切?/p>

标本,有极高的分辨率,可给出细微的胞内结构?/p>

 

SEM

:电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于显像屏上。可?/p>

反映未切片标本的的表面特征?/p>

 

4

.扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么?

 

 

扫描隧道显微镜(

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Binnig

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1981

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发明?/p>

是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的?/p>

当原子尺度的针尖在不?/p>

一个纳米的高度上扫描样品时?/p>

此处电子云重叠,

外加一电压

?/p>

2mV~2V

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?/p>

针尖?/p>

样品之间产生隧道效应而有电子逸出?/p>

形成隧道电流?/p>

电流强度和针尖与样品间的

距离有一指数关系?/p>

当探针沿物质表面按给定高度扫描时?/p>

因样品表面原子凹凸不

平,使探针与物质表面间的距离不断发生改变,从而引起电流不断发生改变。将?/p>

流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态?/p>

扫描隧道显微镜的分辨率很

高,横向?/p>

0.1~0.2nm

,纵向可?/p>

0.001nm

。它的优点是三态(固态、液态和气态)

物质均可进行观察,而普通电镜只能观察制作好的固体标本?/p>

 

优越性:

1)

高分辨率

 

原子级分辨率,横向为

1

埃,纵向?/p>

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