内容发布更新时间 : 2025/6/21 0:01:41星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
低温干燥后作为柱色谱样品。
经2.5%碳酸钠水溶液萃取后的乙醚层，继续用2.5%碳酸钠水溶液120ml分4次萃取，乙醚层经薄层色谱检查，知芦荟大黄素己除去。合并4次碳酸钠萃取液，酸化，得芦荟大黄素沉淀。
（3）经2.5%碳酸钠水溶液萃取后的乙醚层，再以0.5%氢氧化钠水溶液100ml分4次萃取至碱水层无色为止，合并氢氧化钠萃取液，酸化得沉淀，为大黄酚和大黄素甲醚混合物。
4、 硅胶柱色谱分离精制大黄素
（1）装柱：取100~200目的硅胶约10g，按干法装柱
（2）加样：将样品溶解于5ml石油醚（沸程60~90℃）-乙酸乙酯（7：3）中，用吸管吸取样品溶液于色谱柱柱床顶端。
（3）洗脱：用石油醚（沸程60~90℃）-乙酸乙酯（7：3）为洗脱剂洗脱，分段收集，每份10ml，用硅胶薄层板跟踪检查（被洗脱的成分先后顺序为：大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素等）。合并大黄素部分，适当浓缩，放置析晶，过滤，即得纯品大黄素。 5、大黄素的鉴定
（1）在薄层板上用点滴反应检查大黄素对NaOH、MgAc2试液的反应 （2）测定大黄素的熔点。 四、 操作要点
1、本实验多次使用乙醚，因此需注意安全防火，绝对禁止有明火的情况下使用乙醚。 2、采用梯度pH萃取法分离萃取各游离蒽醌成分时，操作不宜过分剧烈振摇，以免乳化，难以分层。
3、硅胶柱色谱整个操作过程硅胶柱表面应保持一定高度的洗脱剂，不使柱面溶液流干。 4、柱色谱洗脱时流速不应太快，以免柱交换来不及达到平衡，影响分离效果。 5、柱色谱时所用的仪器要干燥。 五、 思考题
1、大黄中五种羟基蒽醌化合物的酸性和极性大小应如何排列？为什么？ 2、梯度pH萃取法的原理是什么？适用于哪些中药化学成分的分离？ 3、试分析薄层色谱图谱中各羟基蒽醌类成分的结构与Rf值的关系。
实验三 槐花米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐花米系豆科槐属植物sophora japonica L的花蕾，自古作为止血药。其中所含主要化学成分为芦丁，亦称芸香苷，药理实验证明芦丁具有减少毛细血管的通透性作用，临床上主要用为防治高血压病的辅助治疗药物。此外，芦丁对于放射线伤害所引起的出血症亦有一定作用。
芦丁广泛存在于植物界，已发现的含芦丁植物至少在70种以上，其中以槐花米和荞麦叶含量较高，可作为提取芦丁的原料。 一、 实验目的和要求
1、以芦丁为实例学习黄酮类化合物的提取分离方法
2、掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的鉴定方法 3、通过槲皮素的乙酰化反应，要求得到纯品槲皮素五乙酰化物 4、掌握纸色谱和薄层色谱的方法及黄酮类化合物的色谱特点 二、实验原理
1、芦丁可溶于热水，难溶于冷水。其分子结构中具有较多的酚羟基，显弱酸性，在碱中易溶解，而在酸性条件下易析出沉淀。故可采用碱提酸沉法提取芦丁。
2、利用芦丁可被稀酸水解，生成苷元和糖。通过纸色谱和薄层色谱及苷元的乙酰化衍生物进行鉴定和确认。
OHHOOOOH三、实验方法
OHOHHOOOHOHO槲皮素
OH芸香糖芦丁O1、芦丁的提取 于1000ml烧杯中加入500ml蒸馏水，煮沸2~3min后，称取40g槐花米（粗粉），投入沸水中，直火加热煮沸约5min，在搅拌下小心加入石灰乳调至pH8~9，加热微沸30min后，注意添加水，保持原体积并维持pH8~9，趁热过滤，滤渣再加入200ml水，加石灰乳调pH8~9，煮10min，趁热过滤，合并滤液，稍冷（60~70℃），用浓HCl调至4~5，放置后析出沉淀，抽滤，用水洗3~4次，置空气自然干燥得淡黄色粗制芦丁。
2、芦丁的精制 将芦丁粗品置500ml烧杯中，加适量（约100ml）蒸馏水，再用石灰水调至pH8。加热煮沸数分钟，使充分溶解。趁热抽滤，滤液滴加3mol/L HCl调至pH7，放置
18小时以上，即析