高中生物实验总结 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/5/20 20:45:47星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

高中生物实验总结

实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布

1.实验原理: 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布;甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同: 甲基绿+DNA→绿色

吡罗红+RNA→红色

2.分布:真核生物DNA主要分布在细胞核中;

线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA; RNA主要分布在细胞质中。

3.实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.

4.实验结论:DNA主要分布在细胞核中;RNA主要分布在细胞质中; 5.实验流程:

(1)取口腔上皮细胞制片:①载玻片上滴一滴质量分数为:0.9%NaCl溶液;

②漱口后,用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下; ③载玻片在酒精灯上烘干,盖上; (2)水解:①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中; ②大烧杯中加入30℃温水;

③将小烧杯放入大烧杯中保温5min;

(3)冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s; (4)染色:①吸水纸吸去载玻片的水分; ②滴两滴混合染液,染色5min; ③吸去多余的染液,盖上盖玻片; (5)观察:先低倍后高倍; 6、几种液体在实验中的作用:

(1)0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形态。

8%的HCl:①改变细胞膜等的通透性; ②使染色质中的DNA与蛋白质分开。 蒸馏水:配置染液;冲洗载玻片。 (2)混合染液需要现配现用;

(3)该实验不宜用深色的材料,避免颜色对实验的干扰。

实验二、 物质鉴定

一、实验原理:还原糖 + 斐林试剂~砖红色沉淀(水浴加热)

脂 肪 + 苏丹III ~橘黄色 (滴液观察或制片显微镜观察)

脂 肪 + 苏丹IV~ 红色

蛋白质 + 双缩脲试剂 ~紫色反应 (不加热)

1、还原糖的检测

(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如:苹果,梨,白萝卜。

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(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。

(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)

操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高,(去皮、切块、研磨、过滤) 组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂; 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu 0( OH ) 2在70~ 90C下分解成黑色CuO和水; 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu OH生成。 防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤; 缩短实验时间。 4. 试管放在盛有50-65C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀)

★模拟尿糖的检测

01、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果:试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。 2、脂肪的检测

(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。

(2)步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓

染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精) ↓

制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片) ↓

镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)

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操 作 方 法 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 注 意 问 题 干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。 解 释 因为浸泡时间短,不易切片;浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。 染色时间不宜过长。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 时间一长,油滴会溶解在乙醇中。 用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。

3、蛋白质的检测

装片不宜久放。 (1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)

(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察

操 作 方 法 制备组织样液。 (浸泡、去皮研磨、过滤。) 鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。 注 意 问 题 解 释 黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 先加NaOH溶液,为Cu与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,2+会导致Cu变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。 以免影响颜色观察 2+可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 附:淀粉的检测和观察 碘液不要滴太多 用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。

4、考点提示:

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