内容发布更新时间 : 2024/6/9 6:04:24星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

课题1微生物的实验室培养

1.培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等营养物质。

2．实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。

3．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。

4．平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法。

5．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物；灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括

孢子和芽孢。 培养基及无菌技术 [自读教材·夯基础] 1．培养基

(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养物质。

(3)营养成分：水、无机盐、碳源、氮源，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。

2．无菌技术

(1)目的：获得纯净培养物。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法[连线]：

1．下面是查氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题：

蔗糖 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 琼脂 水 15 g 3 g 1 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 15～20 g 定容至1 000 mL (1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基？为什么？ 提示：固体培养基。因为该培养基加入了凝固剂琼脂。

(2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是什么？ 提示：4类物质。分别是碳源、氮源、无机盐和水。

(3)蔗糖提供的是哪类营养物质？NaNO3提供的是哪类营养物质？ 提示：蔗糖提供的是碳源。NaNO3提供的是氮源和无机盐。

(4)在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物所需要的哪些条件？

提示：满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。

2．探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。 提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。

3．消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？

提示：消毒是杀灭病原微生物和有害微生物，并不要求杀灭一切活的微生物；而灭菌则是杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。

[跟随名师·解疑难]

1．培养基的成分 营养物质 定义 凡能提供所需碳元素的物质 作用 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些主要来源 无机化合物：CO2、NaHCO3等；有机化合物：糖类、脂肪酸、碳源 是异养生物的能源物质 花生粉饼、石油等 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 酶和核酸的组成成分 无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 维生素、氨基酸、碱基等 氮源 凡能提供所需氮元素的物质 生长必不可少的微生长因子

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量有机物 在生物体内含量很高 不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定 细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂 无机化合物 外界摄入 水 为微生物提供除碳、无机盐 氮以外的各种重要元素，包括大量元素 2.实验室常用的消毒和灭菌方法 项目 概念 常用方法 煮沸消毒法：在100 ℃煮沸5～6 应用范围 一般物品 使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物消毒 体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子) min 巴氏消毒法：在70～75 ℃煮30 min 一些不耐高温的液体，或在80 ℃煮15 min 化学药剂消毒法 如牛奶 如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒法：紫外灯照射30 min 接种室、操作台 灼烧灭菌：酒精灯火焰 使用强烈的理化因素杀死物灭菌 体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 干热灭菌：在160～170 ℃下灭菌1～2 h 高压蒸汽灭菌：在压力为100 kPa，温度为121 ℃的条件下，灭菌15～30 min 接种工具的灭菌和试管口的灭菌 玻璃器皿、金属工具的灭菌 培养基及容器的灭菌 大肠杆菌的纯化培养 [自读教材·夯基础] 1．制备固体培养基

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